【机构】 （1西南大学园艺园林学院，重庆 400716； 2西南大学柑桔研究所/农业部柑橘产品质量安全风险评估实验室（重庆），重庆 400712； 国家柑桔工程技术研究中心，重庆 400712）；
【摘要】 【目的】建立超高效液相色谱快速、同时测定柑橘中主要酚酸和类黄酮组成及含量的方法，为柑橘中酚类物质的开发提供技术支撑。【方法】首先对上机条件优化，检测波长选择基于全扫描（190—400 nm），选择所有物质都有最大吸收光谱的波长；柱温、流动相类型和流速优化参考相关文献，为了能使基线分离，采用梯度洗脱方式；再从提取剂类型、提取次数和时间进行单因素比较试验，对柑橘样品处理方法进行优化；柑橘样品经乙酸乙酯振荡提取30 min，果皮和果肉分别提取4次和 3次，蒸发浓缩，甲醇定容上机进行测定。【结果】以ACQUITY UPLC BEH C18液相色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）为分离柱，柱温为35℃，进样量为3.0 μL，流速为0.3 mL·min-1；梯度洗脱，以 0.3%乙酸水溶液（A）/甲醇（B）为流动相：95%—80%（0—3 min）A，80%—80%（3—8 min）A，80%—70%（8—12 min）A，70%—20%（12—17 min）A，20%—95%（17—20 min）A；定量波长为283 nm。19种物质在 18 min 内基线分离，线性范围为 0.01—500 mg·L-1，线性相关系数均大于 0.999，精密度、重复性和稳定性良好（相对标准偏差小于5%）。两个水平下加标，果皮回收率为85.8%—109.4%（相对标准偏差为0.86%—6.06%），果肉回收率为88.4%—112.7%（相对标准偏差为1.05%—5.23%），方法检出限为0.001—0.09 mg·kg-1（S/N=3）。采用此方法对实际样品进行检测，样品包括 5 大类柑橘：宽皮柑橘类（沙糖橘和椪柑）、甜橙类（纽荷尔脐橙）、柚类葡萄柚类（鸡尾葡萄柚）、枸橼柠檬类（柠檬）和金柑类。不同品种类黄酮和酚酸物质含量和种类差异较大，就总酚类物质而言，椪柑和鸡尾葡萄柚果皮中最高，椪柑是金柑的5倍，是其他品种的1—1.5倍，果皮为果肉的3—5倍；就类黄酮物质而言，鸡尾葡萄柚果皮中总含量最高（1 813.22 mg·kg-1），其次是椪柑、纽荷尔脐橙、沙糖橘、柠檬、金柑，果肉总含量变化趋势与果皮一致，果皮明显高于果肉；黄烷酮（圣枸橼苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮甙、香蜂草甙、柚皮芸香甙、柚皮素和橙皮素）是柑橘中主要的类黄酮，鸡尾葡萄柚果皮中最多（1 491.8 mg·kg-1），其次是柠檬和纽荷尔脐橙，最少的是金柑，而果肉含量明显低于果皮；就酚酸而言，沙糖橘果皮中最多（515.21 mg·kg-1），其次是椪柑、柠檬、鸡尾葡萄柚和纽荷尔脐橙，金柑最少，果肉中变化趋势与果皮一致，果皮含量为果肉的 3—5 倍；绿原酸，阿魏酸是主要的酚酸。【结论】利用超高效液相色谱仪，建立了同时快速检测柑橘中主要酚酸和类黄酮物质的方法。该方法高效、精确、低耗、环保，并经实际样品（5 大类柑橘）验证，表明该方法可作为柑橘中酚酸和类黄酮同时、快速检测的常规分析方法。
